直接放于培養箱內，保證細胞穩定生長；
? 長時間監控活細胞樣本，實時自動化獲取成像和分析數據；
? 全自動 X-Y-Z 掃描，實時自動化聚焦，通道轉換和拍攝；
? 多通道成像，包括紅綠藍和明場通道；
? 兼容各類常規培養容器，無需特殊耗材；
? 高清晰成像，配備科研級大尺寸 CCD（索尼 2/3 英寸，280 萬像素）；
? Z-stack 多層成像，分析樣品細節；
? 全自動大孔拼接成像（4×，10×，20×，6-384 孔板，培養皿，載玻片）;
? 專用分析軟件，可自動化生成生長曲線,影像資料和相關分析數據,；
? 操作簡便，易學易用，適用實驗室所有研究人員；
? 獨特的選取視野位置方式，減少實驗重復性；
? 多種成像方案，包括實時定點錄像；疊加成像，矩陣成像，全孔成像，實時
成像，明場和熒光成像，預掃描成像；
? 可自動拍攝微流控芯片和細胞定位格子培養皿等；
? 可對 Fluidigm C1 芯片進行捕獲點檢查及評估捕獲效率，便于后期單細胞測序；
Juli stage 應用
1、監控細胞增殖
細胞增殖是細胞生物學常規實驗，juli stage 多功能細胞實時無標記分析儀提供自動化的成像
監控方法，可監測細胞形態上的變化，既可以無標記定量，又可以用熒光標定細胞核，
觀察細胞核的大小及計數。
關鍵特點：
定量數據：1）由實時圖像獲得定量的動態的過程指標；2）指標為非侵入型，如單
層飽和度；3）標記指標（GFP 或 RFP 或 dapi 通道的活細胞染色）可進行細胞核計數；
4）所有動態信號均有圖像和影片驗證。
2、細胞毒性和活力檢測
發生細胞毒性時，細胞膜會破裂，這時使用非滲透的染料，如 YOYO-1 等染料就可以將
發生細胞毒性的細胞染色，然后用 juli stage 進行觀察。
關鍵特點：
1）使用核標記試劑 CellLight Nucleus-RFP，BacMam 2.0 或 Hoechst 等標記健康細胞細胞毒性染料 YOYO-1 標記發生毒性細胞，同時監測細胞增殖和細胞毒性；2）打破常規
方法固定時間點細胞活力或毒性檢測的局限性，可以實時動態地記錄細胞活性在不同生
理環境下的短期和長期的變化；3）自動數據獲?。嚎稍谂囵B箱中自動收集相差圖像和
熒光圖像；4）自動量化隨時間變換的細胞個數，單層匯合度，整孔匯合度，熒光強度
數據；5）高度可重復性：實時動態的細胞死亡記錄是高度可重復的
3、細胞遷移/侵襲實驗
關鍵特點：1）可對各種原代細胞系和長生細胞系進行非標記的細胞遷移定量測定，包括 H
UVEC 細胞和腫瘤細胞系；2) 獨特的孔內視野位置任意選擇功能，保證所選擇傷痕圖片的質
量，減少實驗重復性；節省不必要的耗材費用；3)自動定量測量相對傷口密度，細胞覆蓋度，
劃痕寬度；；并輔以圖像和時序錄像驗證藥理學作用；4）可用 RFP/GFPDAPI 通道熒光標記
細胞，定量監測共培養的細胞遷移和侵襲；5）可用 RFP/GFP/DAPI 通道標記細胞，定量監
測共培養的細胞遷移和侵襲；6）可配備 96 孔細胞遷移/侵襲 scratcher 套件,使用 96 孔劃痕
器，僅需一個按鈕，就可以在 96 孔微孔板上生成 96 個均勻一致的劃痕，然后用 juli stage
記錄劃痕愈合實時動態全過程,同一塊 96 孔微孔板中通過 4×、10×或 20×的物鏡測量 2D
的細胞遷移和 3D 的細胞侵襲，并進行對比；并提供更豐富的基于時間推移的持續性圖像采
集指標：相對傷口密度，細胞覆蓋度，傷口覆蓋度，劃痕寬度，傷口閉合速度;
4、細胞凋亡
CellTrace 細胞增殖試劑盒含有細胞膜通透性非熒光酯，可通過擴散透過細胞膜進入細胞，并與
胺基反應形成熒光分子。這種無熒光的酯進入細胞后，可被胞內酯酶轉化為熒光產物?；罨溺?
珀酰亞胺酯與蛋白質中的胺基基團共價結合，使染料能夠長時間保留在細胞中。經過后續細胞分
裂階段，各個子代細胞會從母細胞中接收到熒光染料，因此可以長期指示細胞增殖情況；配合 C
aspase 3/7 細胞凋亡試劑（或 Annexin V EGFP/FITC 標記試劑）可以實時監測細胞凋亡；
關鍵特點：1）用 CellLight Nucleus-RFP，BacMam 2.0 慢病毒試劑標記健康細胞（也可以采
用 hoechst 染色活細胞，用 CellTrace violet cell proliferation kit），用 Caspase 3/7 試劑（或
Annexin V EGFP/FITC 標記試劑）標記凋亡細胞,同時監測細胞增殖和細胞凋亡； 2）用 4×、
10×或 20×物鏡觀察高清晰度相差圖像，以確定細胞的死亡；3）可觀察多種化合物和藥物
對誘導細胞凋亡的作用。
5、3D 腫瘤
可跟蹤和定量非貼壁的三維腫瘤球體的形成、生長和收縮,監控藥物抑制腫瘤球體的情況；
關鍵特點：1）簡單的 96-或 384-孔實驗方案，使用低成本、圓底、低吸附性的微孔板；2）
軟件可自動獲取、分析圖像，數據可導出計算 EC50 和 IC50；3）可在同一個孔中，用同樣
的試劑平行進行 2D 和 3D 的實驗；4）用熒光面積或熒光強度指標，監控和測量腫瘤球體隨
時間的生長和收縮；5）可自動定量分析球體大小，周長，面積，體積等參數;
6、干細胞分化和單克隆篩選
可實時監控 IPS，多功能干細胞定向分化，單克隆篩選，用高清晰度全孔相差圖像確認和跟
蹤克隆的形成，可回溯以往的圖像。
關鍵特點：1）可用高清晰度相差圖像確認和跟蹤克隆的形成，而無需將其取出培養箱，全
孔成像可觀察到孔的邊緣；2）可監控和計算轉導效率和重編程效率； 3）降低人工成本，
提高工作效率；4)全孔圖像可細節放大，以確認分化形態；5）快速瀏覽 96 孔板來確認克隆，
無需用顯微鏡一個個觀察；2）用時序性圖像可以確定克隆來源于單個細胞；6）高清晰度相
差成像可生成從 96 孔板到 35mm 培養皿的全孔圖像，孔的邊緣也能清楚看到； 7）可對克
隆進行快速孵育和擴張，并得到克隆的生長指標
7、細胞周期檢測
結合 Premo? FUCCI 細胞周期指示劑（一種基于熒光蛋白的系統，它使用了與不同細胞周
期調控因子融合的紅色 (RFP) 和綠色 (GFP) 熒光蛋白： cdt1 和 geminin。 在細胞周期的 G1
期，geminin 被降解，細胞核內呈現紅色熒光。 在 S、G2 和 M 期，cdt1 被降解，細胞核呈綠
色熒光）研究活細胞的周期檢測，對細胞分裂過程中所研究化合物的分布進行了詳細的動力
學分析。
關鍵特點：1）基于圖像定量分析細胞周期的方法，完整記錄活細胞長時間內的細胞周期變化。
2）自動拍攝分裂過程關鍵時間節點的相差圖像和熒標記圖像及細胞分裂過程影像，自動定量分
析各周期分布中的熒光標記細胞數量；
8、免疫殺傷和聚集
免疫細胞能夠識別并殺死腫瘤細胞是人宿主防御機制的關鍵組成之一?；诳贵w的細胞介
導的細胞毒性（ADCC）和 T 細胞殺傷是細胞介導的免疫反應的兩種機能。這兩種過程都包
括：對免疫細胞群落（如自然殺傷細胞 NK 或有細胞毒性的 T 淋巴細胞 CTL）的刺激，然
后有活性地溶解目標細胞。理解免疫細胞和癌癥細胞的相互作用，保持及促進免疫系統抗擊
和消除腫瘤細胞的能力是目前研究的熱點之一（“癌癥免疫治療”或”免疫腫瘤學“）。
關鍵特點：1）目標腫瘤細胞和免疫細胞（如 T 細胞，NK 細胞）共培養；2）通過加入免
洗的 Caspase3/7 凋亡試劑(或 YOYO-1 試劑等)直接檢測腫瘤細胞的死亡；3）自動圖像分析
可選擇性地對腫瘤細胞死亡進行定量，通過 CellLight Nucleus-RFP, BacMam 2.0 慢病毒標記
試劑還可以對腫瘤細胞進行標記和計數，計算腫瘤細胞的增殖； 4）通過 Hoechst 核標記免
疫細胞，可監控免疫細胞的聚集效應；5）實時成像可揭示免疫細胞和癌癥細胞間的動態的
相互作用，可分析細胞形態；6）可定量腫瘤細胞熒光強度顯示殺傷效果；
圖為 CART 殺傷 HEP3B（人肝癌）細胞研究圖像及分析數據, 拍攝前培養基內加入 YOYO-1，
HEP3B 被 CART 細胞殺傷后表達綠色熒光，以 MOK-T 為對照孔，處理組分別為 GPC3-CART 組
和 GPC3-CART-8CD47(抗體)組；圖 A， B，C 分別 juli stage 拍攝的 0h,15h,38h 不同處理
的殺傷效果圖；可以明顯看到相對于處理孔，GPC3-CART 組和 GPC3-CART-8CD47 組綠色熒光
明顯增多，正?；钚缘陌┘毎蠓鶞p少，且前者癌細胞表達綠色熒光更為快速，最終殘留的
癌細胞最少； D 為隨時間變化的熒光強度曲線，可以很明顯地看到，橙色曲線代表的
GPC3-CART 組熒光表達能力最強，最為快速，同樣說明 GPC3-CART 組殺傷效果明顯，而有抗
體的殺傷效果在初期并不明顯，而后突破某個時間點后殺傷效果慢慢顯現。
9、血管生成
血管新生是一種復雜、多步的過程，包括內皮細胞增殖、內皮細胞遷移和血管形成。用
20-amino-acid OPN peptide (OPNpt20)誘導人臍帶血管內皮細胞（human vascular endothelial
cells，HUVECs），HUVEC 細胞就會有血管樣結構生成，然后用 juli stage 進行觀察。juli stage能監測血管生成的全過程，同時測定藥物對血管生成的作用。關鍵特點：1）juli stage 軟件可自動獲取時序性圖像，顯示血管新生過程中的所有階段的變
化；2）觀察時間可長達 2 周， 3）提供血管長度、血管數量、血管面積和分支節點個數等
動態指標 5）能測量促血管生成和抗血管生成的作用；可研究復雜的通路，包括血管內皮生
長因子和非血管內皮生長因子信號介導的血管新生和血管分解；6）所有數據均有圖像和動
態影像進行驗證； 7）juli stage 可控制硬件系統進行 Z 軸多層成像的方式，通過軟件三維
重建，得到三維血管生長的完整信息；
