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          怎么判斷胎牛血清質量

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          點擊次數:112 更新時間:2023年10月20日15:22:16 打印此頁 關閉

              胎牛血清在整個細胞培養過程是重要的細胞營養來源,但是又受制于產地和生產工藝的影響,不同來源,不同品牌的胎牛血清質量上還是有比較大的差異。胎牛血清生產商供貨時都可以提供質檢報告,通過質檢報告一些數據可以大概了解血清的品質,實際大家在購買之前還是想先試用,試用后才會稍微放心些,下面介紹幾種簡單的實驗測試檢測血清質量的方法。

          1 接種率測試

          這個實驗主要用于優化出一個最合適的血清使用濃度。

          把新到批次的血清按不同的濃度比例配制成完全培養基,例如5%、10%、15%和20%濃度的完全培養基。

          然后以10-100個細胞/mL的濃度進行接種,并分別使用上述不同血清濃度的完全培養基進行培養2周,觀察細胞的不同濃度下的細胞存活率以及細胞集落的面積變化,從而得出一個最合適的血清濃度。QQ.png

          例如,10%和15%的結果都可以接受的話,則應使用10%進行培養,一方面可以節省血清使用,其次也可以降低血清存在時對細胞生長產生的其他不可控影響因素。

          2 生長曲線

          這個實驗用于判斷不同批次間的血清對細胞生長的影響。

          以正常培養的濃度進行細胞接種,并觀察記錄細胞達到不同的密度所需要用到的時間。

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          例如,如果細胞使用這一批次的血清時,其生長停滯期的時間較長,說明細胞需要對這個批次的血清進行較長時間的適應后才能正常生長;

          如果細胞進入指數增長期后,倍增速度快,也就是長得很快,說明這批次的血清對細胞的生長促進效果很明顯;

          如果細胞進入平臺期后,其密度比以往的血清批次要更高,說明該批次的血清的經濟效率更高,反之亦然。

          怎么繪制細胞的生長曲線?有一個簡單的方法,可以直接用MTT,也可以用可連續觀察的細胞計數儀或觀測系統。

          3 細胞特征觀察

             這個實驗用于判斷該血清是否會存在一些影響因子,對細胞的基因表達產生影響。

          這個實驗對藥物篩選、需要細胞定向分化或分泌物進行的項目非常有必要。

          觀察細胞特征,除了要對細胞的形態特征進行判斷,還需要從分子和蛋白水平去檢測對比。

          例如在正常培養階段,提取細胞RNA進行待研究的基因的表達分析,看看血清是否會對該基因的表達產生上調或抑制,如果有,那說明該血清的存在可能會影響你的課題實驗的結果準確性。

          4 血清污染物的檢測

             通常商業化的血清出廠前都會進行嚴格的微生物清除,但仍有極少數可能有部分的血清會存在支原體的污染,或在實驗室進行血清分裝時帶入了微生物的污染。

             因此,我建議,有條件的同學在使用血清前,應該先取一點血清或已配制完成的完全培養基進行空白培養,觀察其是否存在細菌、真菌等微生物的污染,確認沒有問題后再進行正式的細胞培養。

          而支原體污染的風險,則只能通過PCR、熒光染色等進一步的實驗方法進行檢測了。

          這里還需要特別強調的一點是,有的同學會通過看血清的顏色是否紅、橙紅來判斷血清質量,這是玄學,沒有科學依據。

          血清的顏色如果較紅,代表其在采集過程中,動物出現了一定程度的溶血,這和采集工藝有關,和血清本身質量無關。

          另外,血清解凍后,有時會看到有一些絮狀物,這種絮狀物也不一定是微生物污染,有可能是血清內的蛋白質凝集而成的。

          它的存在可能對細胞產生刺激,不利于細胞生長,但血清還是可以用的,這些絮狀物體積大無法通過過濾去除,我們可以嘗試離心完成清除后繼續使用該瓶血清。

           給大家介紹一個優質胎牛血清品牌NEWZERUM,NEWZERUM成立于2015年,位于新西蘭的“花園之城”——基督城(Christchurch, 又譯克賴斯特徹奇),是一家專注于動物源性產品的生產廠家,主要產品包含胎牛血清、新生牛血清、成牛血清、牛血清白蛋白(BSA)和其他血液蛋白制品。自公司建立以來,憑借為客戶提供“卓越的產品和服務”的經營理念,一直保持著持續穩定的業務増長。 NEWZERUM是由擁有百年歷史的國際動物制品公司協助成立的,堅持為客戶提供高標準 的生物制品。產品原料來源于新西蘭/澳大利亞/烏拉圭/中國等具有資質的屠宰場,以及由美國農業部和歐盟批準的機構,動物原料具有完整的可追溯性。

          NEWZERUM單批次產能可達2000L,在確保單一批次均一質量同時,提供充足的血 清供應。原血清在依照cGMP標準的無菌過濾設備中通過連續的三層0.1um濾膜過濾后進行灌裝。生產車間建有百級無菌全自動灌裝線,確保過濾后的血清在最短時間內灌裝完畢,最大程度減少人工灌裝帶來的潛在污染可能。確保每一瓶血清都在嚴格的規范下生產。

          NEWZERUM血清型號豐富,可滿足不同細胞的培養需求。質量穩定,批次間差異小,長期使用無煩勞,可先試用后購買。

          詳情請咨詢成都碩研科技有限公司  13458592595(微信同號


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