如今市場上在細胞培養及觀察領域又出了新的耗材——玻底皿/板,這給細胞觀察帶來很大便利,在這里我就對它們做一些下詳細的介紹。
?玻底皿——簡介
又稱玻底皿,玻底皮氏皿,玻底微孔皿,玻底滅菌培養皿,蓋玻片底皿,其結構特點是在塑料平皿的圓形底部中央打出一個直徑1 cm左右的圓孔并從平皿底部的外面粘上一片厚度約為0.17mm透光性極好的蓋玻片以密封圓孔配有平皿蓋。
使用時,將相配套的玻底皿支架放到顯微鏡的載物臺上。再將載有樣品的玻底皿放到該玻底皿支架,即可用顯微鏡觀察樣品或者用共聚焦顯微鏡掃描樣品。
?玻底皿——用途
玻底培養皿和玻底培養板主要用于要求放大倍數高、培養器皿底面透光性能好的顯微實驗,如激光共聚焦顯微實驗、熒光顯微實驗和相差顯微實驗等。玻底培養皿和玻底培養板底面薄,透光性能好, 滿足了上述實驗的要求。同時玻底培養皿和玻底培養板底面的小孔也減少了實驗過程中抗體等試劑的使用量。
?玻底皿應用的顯微鏡領域一般包括:共聚焦顯微鏡,高分辨率顯微鏡,熒光成像,活細胞成像,相差顯微鏡,微分干涉相差顯微鏡,偏振光顯微鏡,延時攝影,視屏增強顯微鏡。玻底皿同時適合于GFP和顯微注射技術研究結合領域。
?玻底板——簡介
玻底多孔培養板與玻底皿具有相同的玻底和光學特性,允許研究者使用高批量生產,高通量篩選,珍貴試劑使用的量更少。
?玻底板——用途
常規玻底皿可以使用的大多數領域都可以使用多孔玻底板。最常應用于熒光/免疫顯微鏡,共聚焦,實時成像,顯微注射,電子視頻顯微鏡,相差和延時光學顯微鏡。
玻底板——優點
多孔玻底板的最大優勢是可以在同一塊板上在一致的條件下培養6,12,24,95孔培養物。多孔板適合高通量,高容量篩選領域。
利用多孔板分析是流線型的,因為只需處理一個板(相對于用多個皿來說)。
對一些領域來說,使用多孔板處理培養物變得簡單化(例如:發光)多孔板的孔徑更小,對于小體積的珍貴試劑來說是極其有效的。
? 玻底皿兼有平皿和蓋玻片的雙重特點:
①其底部的蓋玻片為透光性極好的光學玻璃,透光性比塑料平皿好;
②底部蓋玻片厚度不大于0.17mm,適用于高倍鏡觀察和高質量成像;
③觀察時.細胞上方有液體覆蓋,不必加蓋玻片,因此能夠保持細胞等樣品不變形,不干燥,保持其原有形態;
④可以在皿中隨時加入或吸出液體,因此可以隨時對細胞進行洗滌或加刺激物等處理,利于維持細胞的生長和實驗操作;
⑤用倒置顯微鏡觀察細胞時,可以蓋著玻底皿蓋觀察,保持細胞的無菌狀態,利于細胞培養:
⑥節省試劑和細胞,簡化操作過程。
玻底皿/板的使用方法,具體如下 :
玻底培養皿和玻底培養板使用方法
1 預平衡:在玻底培養皿加入3ml培養液,在培養箱中放置15分鐘。
2 加細胞:吸去培養液,在底孔中加入500ul含細胞的培養液。在培養箱中放置 2 小時,讓細胞沉降貼壁。
3 加培養液:小心加入2-3ml不含細胞的培養液。該步驟用于為細胞提供足夠的培養液,同時減少由于水份揮發帶來的滲透壓的變化。
*根據實驗的要求,可以合并步驟2和3,在預平衡后直接加入2-3毫升含細胞的培養液