胎牛血清在整個細胞培養過程是重要的細胞營養來源,但是又受制于產地和生產工藝的影響,不同來源,不同品牌的胎牛血清質量上還是有比較大的差異。胎牛血清生產商供貨時都可以提供質檢報告,通過質檢報告一些數據可以大概了解血清的品質,實際大家在購買之前還是想先試用,試用后才會稍微放心些,下面介紹幾種簡單的實驗測試檢測血清質量的方法。1 接種率測試這個實驗主要用于優化出一個最合適的血清使用濃度。把新到批次...
一、miRNA簡介: microRNA(miRNA)是一種約19-25個堿基、內源性、非蛋白編碼和進化上高度保守的單鏈RNA。miRNA通過轉錄后基因調控的方式調節遺傳信息的流動和表達,與細胞的增殖、分化、凋亡和新陳代謝等密切相關,是生命科學領域的研究熱點。miRNA研究的關鍵在于如何準確、特異性地檢測和定量miRNA。就目前而言,熒光定量PCR是應用最廣的檢測和定量miRNA的方法。其中,探針法...
血球計數板一直是實驗室細胞計數的金標準。早在18世紀的法國,醫生就開始用血球計數板分析病人的血液樣本。經過100多年的不斷改進,如今的血球計數板相比其原型在準確性和便捷程度上都有了大幅提高,成為了現代細胞學研究的重要工具之一(對該歷史感興趣的小伙伴,請參考《血球計數板的前世今生》)。然而,因血球計數板固有的設計和使用方法帶來的計數誤差依然存在。相信不少小伙伴都有為忽高忽低的計數結果抓狂和...
單細胞基因組學技術目前正應用得如火如荼,比如單細胞RNA測序(scRNA-seq)和染色質轉座酶可接近性測序(ATAC-seq)。與傳統的大量細胞測序方法相比,單細胞基因組學技術突出了細胞之間的差異,有助于更深入地了解樣本材料。例如,scRNA-seq能夠比較健康和疾病狀態下的轉錄圖譜,而ATAC-seq能夠說明染色質可接近性及其對基因表達的影響。 不過,此類研究都需要對分離的細胞核進行準...
問:檢測試劑盒有熒光法和比色法。我應該使用哪種方法?答:第一,這取決于您的設備是熒光光度計還是分光光度計。第二,熒光檢測通常比比色法敏感10倍以上,這意味著,您可以用更少的樣品就可以達到測試目的,如果在樣本數量有限的情況下,使用熒光檢測更為可取。 問:應使用什么樣的檢測板?答:對于比色法,應使用透明的平底板測光密度(OD)。熒光檢測,建議使用堅實的黑色板。對于發光檢測,則應使用不透明的白色板。...
靶向細胞的科研研究和藥物研發避免不了細胞活力的分析和追蹤。但依據實驗的最終目的和關注參數的不同,細胞活力的體現,檢測方法也會不一樣。例如細胞增殖檢測適用于比較不同細胞株增殖能力,而細胞毒性分析則可以用于探究候選藥物是否有細胞毒性等。從分析儀器上來說,現階段主流的檢測平臺,如顯微鏡,流式細胞儀和實時熒光定量pcr儀等都可用于細胞活力的分析,但不同的平臺所關注的指標,靈敏度和通量會有所差異,因...
蛋白質是包括人類在內的各種生物有機體的重要組成成分,是生命的物質基礎之一。生物體的生長、發育、遺傳和繁殖等一切生命活動都離不開蛋白質。隨著分子生物學、結構生物學、基因組學等研究的不斷深入,人們意識到僅僅依靠基因組的序列分析來試圖闡明生命活動的現象和本質是遠遠不夠的。只有從蛋白質組學的角度對所有蛋白質的總和進行研究,才能更科學地掌握生命現象和活動規律,更完善地揭示生命的本質。由此許多學者將生...
一、質粒DNA細胞轉染實驗,應注意以下幾點:1、質粒的大小和質量 線性化還是超螺旋會影響轉染結果:超螺旋質粒的轉染效率比線性DNA高得多,特別是瞬時轉染。而線性化DNA轉染的整合幾率高。質粒太大了轉染會困難一些。畢竟,相對致密、較小的外源異物被細胞內吞的幾率要大一些。如果你的質粒正好比較大,又沒有經驗,選擇特別注明可以轉大質粒的轉染試劑成功幾率會高一些。有的轉染試劑還會提供一些促進DNA凝聚的...
一:基質材料 層析介質常用的基質材料有無機化合物組成硅膠,也有有機化合物組成的聚苯乙烯,還有純化生物大分子最常用的多糖聚合物(瓊脂糖,葡聚糖,纖維素)等。 1.硅膠系列的介質,其剛性大,但不耐堿,多用于制備正反向層析介質,在小分子化合物提取分離,特別是植物提取行業廣泛應用,也多用于分析型色譜柱介質的制備。 2.聚苯乙烯系列填料,剛性較強,層析過程傳質速度高,但是其親水性差疏水性強,生...
當我們純化蛋白時,最重要的就是要保持蛋白在純化過程中不能失活,或者是盡量降低純化過程對蛋白活性帶來的損失。這就意味著蛋白在整個純化過程中要始終保持可溶性和活性。因此設計一個防止蛋白降解和聚合的蛋白純化緩沖體系就非常重要了,尤其會凸顯在實驗結果上。在設計緩沖buffer時應考慮以下幾個因素:pH值、緩沖體系、鹽離子、還原劑和穩定劑。其中每一個因素都要根據你的目的蛋白進行優化,并以目的蛋...